目的：构建针对人 micro-194过表达及抑制表达的慢病毒表达载体，并寻找探讨感染人骨肉瘤细胞系9607和U2-os的最佳步骤和方法。

　　方法：利用PCR方法调取相应目的基因进行酶切，经电泳回收后与目的基因进行连接，产物转化细菌感受态细胞，对克隆进行PCR鉴定和测序对比分析后，构建相应microRNA-194过表达及抑制表达慢病毒表达载体;在人骨肉瘤细胞系9607和U2-os转染及筛选过程中，根据不同阶段及浓度设定相应实验组，并设相应对照组。倒置显微镜观察转染效率，筛选情况，进行比较。

　　结果：1.PCR及测序结果证实重组慢病毒表达质粒构建正确;过表达及抑制过表达重组慢病毒的滴度分别为1.5*108TU/ml及4*108TU/ml;2.感染复数( multiply of infection，MOI) 值测定，实验组及对照组组转染效率无明显差异，获得MOI值及感染时间;3.通过新的综合设计，经筛选后获得转染效率满意的目的克隆细胞。

　　结论：成功构建了microRNA-194过表达及抑制过表达慢病毒表达载体，并通过新的综合考虑设计，对人骨肉瘤细胞系9607和U2-os进行转染和筛选后，可较快和较高效率的获得满意目的细胞。