创伤

赵劲民, 冯学江
广西医科大学第一附属医院创伤骨科手外科

目的 探讨体外分离及扩增纯化兔骨髓基质干细胞的实验方法，并研究其生物学特性；以不同诱导液在体外对BMSCs诱导分化为雪旺样细胞，探讨以BMSCs作为周围神经组织工程种子细胞的可行性。
方法 采用Percoll(密度为1.073g/ml)分离液和贴壁筛选法，从兔股骨中分离BMSCs进行纯化、培养；原代细胞按1: 2比例进行传代培养；在DMEM-LG + 10%FBS中培养，用β-ME、b-FGF和黄芪等为诱导剂对第1, 3, 5代骨髓基质干细胞进行定向诱导分化，倒置像差显微镜观察细胞形态学化，免疫细胞化学鉴定S-100蛋白和GFAP的表达率。
结果 原代及传代培养显示，兔BMSCs具有活跃的增殖能力，第2, 3, 5代细胞的生长曲基本相同；诱导后的兔骨髓基质干细胞具有类似雪旺细胞的形态，免疫细胞化学鉴定显示S-100蛋白和GFAP的表达率(76 ± 6.7)%、(25 ± 5.45)%。
结论 应用本实验方法培养兔髓基质干细胞，体外生长稳定、增殖速度快、可连续传代；采用β-ME、b-FGF和黄芪等为诱导剂，可使兔骨髓基质干细胞在体外向雪旺样细胞分化。