创伤

赵劲民, 范锲
广西医科大学第一附属医院创伤骨科手外科

目的 通过全骨髓贴壁法体外分离培养大鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs），为下一步实验提供稳定的、高纯度的干细胞。
方法 选取4-6周龄健康雄性SD大鼠，无菌条件下取出胫骨、股骨的骨髓，贴壁法培养分离间充质干细胞，传代。取第2代细胞，显微镜下观察形态及生长变化，绘制生长曲线，分别诱导为成骨细胞和脂肪细胞，进行碱性磷酸酶（ALP）、茜素红、von Kossa染色及油红O染色，流式细胞仪检测细胞表面抗原标记物。
结果 全骨髓培养法培养的骨髓间充质干细胞镜下呈梭形或纺锤形，传代后形态单一，传至二代时能保持较强的增殖能力，生长曲线呈“S”型；脂肪细胞诱导实验组油红O染色阳性，成骨细胞诱导实验组碱性磷酸酶（ALP）、茜素红、von Kossa染色阳性，对照组均为阴性； CD44, CD90,CD105表达阳性，CD19、CD34,CD45表达阴性。
结论 全骨髓培养法能获得比较稳定、可靠的骨髓间充质干细胞，在一定的条件下能诱导成为脂肪细胞、成骨细胞，表面抗原检测符合间充质干细胞的特点。