创伤

赵劲民, 李晓峰
广西医科大学第一附属医院创伤骨科手外科

目的 建立大鼠骨髓间充质干细胞的分离、培养、纯化方法，并进行细胞形态学观察、表面标志物鉴定及多向分化能力检测。
方法 通过全骨髓贴壁法体外分离、培养、纯化大鼠骨髓间充质干细胞，进行形态学观察，绘制生长曲线，细胞周期分析，流式细胞仪检测细胞表面标记物，分别向成骨、成脂方向诱导分化，进行染色体分析和荧光增殖示踪分析。
结果 大鼠骨髓间充质干细胞生长以梭形细胞为主，呈放射状排列的细胞集落，细胞生长旺盛，可连续稳定传代10代以上。生长曲线及细胞周期显示骨髓间充质干细胞符合正常细胞生长特征且生长活跃。第3代骨髓间充质干细胞CD44，CD90，CD105均呈阳性表达，而CD34，CD45呈阴性表达。成脂、成骨诱导后，油红O染色、碱性磷酸酶染色、von Kossa法染色和茜素红染色均呈阳性。全骨髓贴壁培养法操作简单，可大量分离、纯化、扩增骨髓间充质干细胞，所获细胞具有间充质干细胞的一般生物学特性，经诱导培养后具有多向分化潜能。
结论 实验所用的全骨髓贴壁法为组织工程提供充足的种子细胞来源具有重要的现实意义。