创伤

赵劲民, 马爱国
广西医科大学第一附属医院创伤骨科手外科

目的 在体外建立一种SD大鼠骨髓间充质干细胞分离纯化、培养扩增、诱导分化及鉴定的方法，为下一步研究提供细胞基础。
方法 应用全骨髓细胞贴壁分离培养法分离培养SD大鼠骨髓间充质干细胞，BMSCs细胞表面抗原CD44、CD90、CD105、CD34、CD45鉴定；BMSCs成脂诱导，油红O染色鉴定；BMSCs成骨诱导，碱性磷酸酶活性检测和硝酸银染色鉴定。
结果 应用全骨髓培养法分离培养出纯度较高SD大鼠骨髓间充质干细胞，分离后细胞活性均大于95%。流式细胞仪检测大鼠骨髓间充质干细胞的CD44、CD90、CD105阳性细胞表达分别为99.34%、99.34%、99.35%，CD34、CD45阴性表达分别为1.47%、1.56%；BMSCc成脂诱导9天，细胞形态学观察及诱导油红O染色均可见细胞内有大量脂滴形成，BMSCc成骨诱导12天，细胞形态学观察可见细胞团块聚集，有不透光致密影，碱性磷酸酶染色和硝酸银染色均表达阳性。
结论 本实验采用的全骨髓细胞贴壁培养法是比较理想的骨髓间充质干细胞培养法，培养的骨髓MSCs纯度高，细胞活力强，生物学性状稳定，其具有在体外自我更新和增殖、多向分化潜能的能力。